Isi
- tahap
- Metode 1 Amati bakteri secara langsung
- Metode 2 Mengukur biomassa
- Metode 3 Lanjutkan dengan turbidimetri
Ada beberapa cara untuk mengukur pertumbuhan bakteri, dan beberapa lebih sulit daripada yang lain untuk diterapkan. Yang paling sederhana biasanya digunakan dan memberikan hasil yang relatif akurat, asalkan ketat selama pengukuran. Teknik yang paling umum adalah pengamatan dan penghitungan bakteri, pengukuran biomassa dan biomassa kering serta turbidimetri. Laboratorium sekolah Anda harus memiliki peralatan yang diperlukan untuk setidaknya satu dari metode ini.
tahap
Metode 1 Amati bakteri secara langsung
-
Siapkan peralatan. Selain apa yang biasanya ditemukan di semua laboratorium biologi, Anda akan memerlukan beberapa item spesifik. Pastikan Anda memiliki semua instrumen dan wadah di ujung jari Anda, sehingga Anda tidak harus bolak-balik di lemari tempat peralatan disimpan. Pikirkan terlebih dahulu apa yang akan Anda lakukan untuk mengetahui apa yang akan Anda gunakan pada setiap tahap. Anda juga harus mengetahui beberapa istilah utama.- Dapatkan hemacytometer. Ini adalah bilah dengan bilik penomoran yang dikaitkan dengan mikroskop. Ini adalah instrumen yang sangat mudah untuk disesuaikan dan digunakan. Anda dapat menemukan beberapa dari pemasok yang berspesialisasi dalam peralatan untuk sekolah dan laboratorium penelitian. Panduan pengguna biasanya disediakan.
- Ambil cawan petri. Ini adalah wadah kecil, bundar, dangkal tempat Anda dapat mengamati bakteri.
- Istilah "budaya" mengacu pada mikroorganisme yang diperbanyak secara artifisial sebagai bagian dari eksperimen ilmiah.
- "Kaldu budaya" adalah media di mana budaya akan berkembang.
-
Gunakan cawan petri. Taruh bakteri di dalam kotak dan amati di bawah mikroskop. Anda juga dapat meletakkannya langsung di slide. Kemudian hitung jumlah sel bakteri yang ada. -
Pastikan Anda memiliki konsentrasi yang benar. Jika ada terlalu banyak bakteri, mereka akan tumpang tindih dan Anda tidak akan dapat menghitungnya dengan benar. Jika ini masalahnya, encerkan biakan dengan mencampurnya dengan sedikit kaldu. Jika jumlahnya terlalu sedikit, hasilnya tidak akan signifikan. Anda kemudian harus menyaring kaldu untuk meningkatkan konsentrasi. -
Hitung bakteri. Langkah terakhir adalah menghitung. Lihatlah bilik penghitungan di bawah mikroskop dan catat jumlah sel yang Anda lihat. Bandingkan hasilnya dengan pengalaman serupa lainnya.
Metode 2 Mengukur biomassa
-
Pastikan Anda memiliki instrumen yang diperlukan. Metode ini lambat untuk diimplementasikan dan melibatkan penggunaan peralatan yang mahal. Jika Anda tidak mencucinya, gunakan teknik lain. Di sisi lain, jika laboratorium Anda memiliki alat yang tepat, pengukuran biomassa dan massa kering sangat ideal karena memberikan hasil yang akurat. Anda membutuhkan:- oven hidrolik konveksi paksa,
- panci berat aluminium,
- beberapa labu Erlenmeyer,
- centrifuge atau sistem penyaringan laboratorium.
-
Periksa apakah pemangkasan berada dalam labu Erlenmeyer. Jika tidak, tuangkan. Pada tahap percobaan ini, bakteri masih dalam kaldu kultur. Mereka akan dipisahkan nanti. -
Keringkan wajan. Untuk ini, letakkan di oven. Anda juga dapat menggunakan filter membran selulosa asetat berdiameter 47 mm dengan pori-pori 0,45 μm. Alat apa pun yang digunakan, ukur massanya secara akurat sehingga dapat dikurangkan dari hasil yang Anda dapatkan saat tanaman diletakkan di atasnya. -
Mix. Agitasi lerlenmeyer agar budaya tersebut homogen. Memang, karena gravitasi, sel-sel secara alami cenderung jatuh ke dasar wadah. Jadi, Anda harus mengocok sedikit untuk yang didistribusikan secara seragam dan sampel Anda lebih representatif. -
Centrifuge. Dengan menggunakan centrifuge, pisahkan bakteri dari kultur kaldu. Perangkat ini digunakan untuk memutar wadah dan penyeimbang pada kecepatan yang sangat tinggi. Kaldu mengalir, yang hanya menyimpan materi hidup. Untuk informasi lebih lanjut, Anda akan menemukan informasi tentang cara menggunakan centrifuge di internet. -
Dapatkan adonan. Jatuhkan di atas wajan. Anda dapat membuang kaldu kultur, Anda tidak akan membutuhkannya lagi, tetapi tetap gunakan lerlenmeyer. -
Bilas centrifuge. Tuangkan air bilas ke panci penimbangan di samping sel bakteri. Hasil yang diperoleh untuk semuanya memberi Anda biomassa. -
Temukan massa kering. Untuk mengetahui biomassa kering dari sampel Anda, tempatkan panci penimbangan dalam oven yang diatur pada 100 ° C selama 6 hingga 24 jam, sesuai dengan instruksi yang disertakan dengan perangkat Anda. Hati-hati jangan sampai melebihi suhu ini untuk menghindari pembakaran bakteri. Lalu timbang semuanya, lalu kurangi massa baki.
Metode 3 Lanjutkan dengan turbidimetri
-
Siapkan peralatan Anda. Anda akan membutuhkan sumber cahaya dan spektrofotometer, alat yang ditemukan di sebagian besar laboratorium sains. Lihat manual pengguna yang disediakan karena setiap model memiliki operasi sendiri. Metode ini adalah salah satu yang paling sering digunakan untuk mengukur pertumbuhan bakteri, karena hanya membutuhkan alat yang murah dan mudah digunakan. -
Bawa cahaya ke dalam budaya. Kekeruhan digunakan untuk mengevaluasi kandungan cairan dalam partikel, itu menentukan apakah itu lebih atau kurang berawan. Hasil yang Anda dapatkan dari pengukuran ini akan diberikan dalam NTU (atau Nephelometric Turbidity Unit). Mungkin perlu untuk melakukan kalibrasi perangkat agar dapat mengukur kekeruhan sampel secara akurat. -
Buat catatan. Kekeruhan adalah jumlah bakteri dalam sampel. Spektrofotometer juga akan memungkinkan Anda untuk mengetahui transmisi solusi (% T), yang nilainya berbanding terbalik dengan kekeruhan. Kemudian membandingkan hasil yang diperoleh pada sampel yang berbeda untuk mengukur pertumbuhan bakteri.